Определение времени вязки у сук.
Половой цикл сук делится на четыре периода: проэструс, эструс, диэструс (другое название метаэструс) и анэструс. Вязка собак происходит во время течки. Течка, включает в себя три периода: проэструс, эструс и диэструс. Овуляция у собак отмечается в стадии эструса. Анэструс представляет из себя период покоя. Вагинальная цитология проводится с целью определения стадии эстрального цикла, определения сроков вязки и родов, для определения отклонений в эстральном цикле, определения природы выделений из вульвы. Нужно помнить, что с помощью этого метода невозможно определить сроки овуляции.
Техника проведения.
Ватный тампон, пропитанный физиологическим раствором, вводится во влагалище. Необходимо избегать касания клитора, ямки клитора и кожи, так как в этих областях содержатся клетки, которые могут помешать интерпретировать результаты. Далее тампон аккуратно прокатывают по предметному стеклу, делая несколько продольных мазков.
![]() |
Предметное стекло, по поверхности которого был прокатан ватный тампон извлеченный из влагалища суки. Видны два продольных мазка. |
Для окраски препаратов можно пользоваться различными красителями. Мы используем для окраски препаратов краситель Дифф- Квик, так же можно пользоваться метиленовым синим и др. красителями. Перед тем как начать окраску препарата, лучше его высушить. Капля красителя помещается на область нахождения клеток и накрывается покровным стеклом.
Какие клетки мы можем увидеть?
Ниже в таблице представлены основные клетки, которые появляются в различные периоды течки у собак.
Описание клеток, которые можно обнаружить при вагинальной цитологии у сук. | Фото клеток | Название клеток | Описание клеток |
---|---|---|
![]() |
Парабазальная клетка | Имеют округлую или слегка овальную форму, небольшое количество цитоплазмы и большое ядро. |
![]() |
Промежуточная клетка | Гладкие, округлые или овальные, имеют неровные очертания и содержащее везикулы ядро, которое меньше, чем ядро парабазальных клеток. Размер этих клеток весьма разнообразен. Они могут быть немного крупнее парабазальных, а могут превышать по величине парабазальные клетки в 2 раза. |
![]() |
Поверхностная промежуточная клетка | Имеют относительно нормальное ядро, но в целом по внешнему виду являются типичными поверхностными клетками. |
![]() |
Поверхностная клетка с пикнотическим ядром | Фактически ядро в клетке уже мало заметно. |
![]() |
Поверхностная безъядерная клетка (клетка - чешуйка) | Крупные, мертвые, неправильной формы клетки, не содержащие ядер. Они представляют собой конечную фазу отмирания, которая начинается уже в парабазальных клетках. Так же часто эти клетки называют "полностью ороговевшими" или "полностью кератинизированными клетками". |
![]() |
Метэстальная клетка | Обычно крупнее промежуточных клеток. В их цитоплазме часто находят один или большее количество нейтрофилов. Метэстральные клетки, как правило, обнаруживаются в начале диэструса или в случаях вагинита. Очень редко такие клетки встречаются в начале проэструса. |
Во время проэструса парабазальные, промежуточные и некоторые поверхностные клетки отторгаются. Обнаруживаются эритроциты, лейкоциты и бактерии. При приближении эструса отмечается значительное повышение эпителиальных клеток и снижение содержания лейкоцитов.
Во время эструса преобладают поверхностные клетки (иногда они составляют более 90% отторгающихся эпителиальных клеток). Могут обнаруживаться эритроциты и внеклеточные бактерии. Лейкоциты в период эструса отсутствуют, за исключением случаев, когда имеет место сопутствующий воспалительный процесс.
Диэструс сопровождается наличием резких изменений: парабазальные и промежуточные клетки превышают по количеству поверхностные клетки. Слои поверхностных клеток могут отмечаться в начале диэструса. Практически всегда снова появляются лейкоциты. Часто обнаруживаются эритроциты и бактерии.
Такие же изменения происходят во время эстрального цикла у кошек, но у них редко обнаруживают эритроциты и лейкоциты.
Цитологические изменения влагалища сук на разных стадиях эстрального цикла. | |||
---|---|---|---|
Клетки | Стадия цикла | ||
Проэструс | Эструс | Диэструс | |
Парабазальные клетки | + | - | + |
Промежуточные клетки | + | редко | + |
Поверхностно промежуточные клетки | +/- появляются ближе к концу |
+ | +/- |
Поверхностные клетки | редко, чаще появляются в конце | более 80-90 % | редко |
Эритроциты | + | +/- | +/- |
Лейкоциты | + | - | ++/+ |
Примеры того, что можно увидеть под микроскопом при вагинальной цитолологии у собак, в разные фазы цикла. | |
---|---|
![]() |
![]() |
Проэструс. Видно большое количество эритроцитов (маленькие красные точки) (х10) | Проэструс. Большое кол-во нейтрофилов, эритроцитов, появляются поверхностные клетки. (х40) |
![]() |
![]() |
Эструс. Более 80% поверхностных клеток (х10) | Эструс (х40) |
![]() |
|
Диэструс. Стрелкой указана метэстральная клетка (х100) |
Подготовка собак к вязке.
- 1. Для вязки подбирайте только здоровых животных.
-
2. Определите первый день эструса. Начинайте в ранний период течки (на третий день проэструса).
Наблюдайте каждый день за поведением суки (провоцируйте ее самцом) и /или проводите регулярное вагинальное цитологическое исследование.
Для более точного определения времени овуляции и дат вязки можно определять содержание прогестерона в сыворотке,
приблизительно за 24-48 часов до предовуляционного выброса лютеинизирующего гормона (ЛГ) концентрация прогестерона поднимается выше 1,0 нг/мл в типичных случаях спустя 2 дня (во время овуляции)
концентрация прогестерона составляет 4-10 нг/мл).
- 3. Когда поверхностные клетки в мазках достигнут 80% от всего количества эпителиальных клеток, необходимо поместить суку с кобелем.
- 4. Вязку следует повторять до тех пор, пока сука не начнет отказываться от вязки (не всегда можно определить) и цитологическая картина будет соответствовать эструсу. Интервалы между вязками в среднем 3-4 дня, однако для каждого конкретного случая нужно подбирать свой режим вязок.
- 5. Обследование на беременность проводится через 21-30 дней. При отсутствии беременности определить содержание прогестерона в сыворотке для оценки овуляции и лютеиновой функции.
Список литературы:
- Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных. М. Уиллард, Г. Тведтен, Г. Торнвальд
- Эндокринология и репродукция собак и кошек. Э. Фелдмен, Р. Нелсон.