Определение времени вязки у сук.

Половой цикл сук делится на четыре периода: проэструс, эструс, диэструс (другое название метаэструс) и анэструс. Вязка собак происходит во время течки. Течка, включает в себя три периода: проэструс, эструс и диэструс. Овуляция у собак отмечается в стадии эструса. Анэструс представляет из себя период покоя. Вагинальная цитология проводится с целью определения стадии эстрального цикла, определения сроков вязки и родов, для определения отклонений в эстральном цикле, определения природы выделений из вульвы. Нужно помнить, что с помощью этого метода невозможно определить сроки овуляции.

Техника проведения.

Ватный тампон, пропитанный физиологическим раствором, вводится во влагалище. Необходимо избегать касания клитора, ямки клитора и кожи, так как в этих областях содержатся клетки, которые могут помешать интерпретировать результаты. Далее тампон аккуратно прокатывают по предметному стеклу, делая несколько продольных мазков.

Предметное стекло, по поверхности которого был прокатан ватный тампон извлеченный из влагалища суки. Видны два продольных мазка.

Для окраски препаратов можно пользоваться различными красителями. Мы используем для окраски препаратов краситель Дифф- Квик, так же можно пользоваться метиленовым синим и др. красителями. Перед тем как начать окраску препарата, лучше его высушить. Капля красителя помещается на область нахождения клеток и накрывается покровным стеклом.

Какие клетки мы можем увидеть?

Ниже в таблице представлены основные клетки, которые появляются в различные периоды течки у собак.

Описание клеток, которые можно обнаружить при вагинальной цитологии у сук.
Фото клеток Название клеток Описание клеток
Парабазальная клетка Имеют округлую или слегка овальную форму, небольшое количество цитоплазмы и большое ядро.
Промежуточная клетка Гладкие, округлые или овальные, имеют неровные очертания и содержащее везикулы ядро, которое меньше, чем ядро парабазальных клеток. Размер этих клеток весьма разнообразен. Они могут быть немного крупнее парабазальных, а могут превышать по величине парабазальные клетки в 2 раза.
Поверхностная промежуточная клетка Имеют относительно нормальное ядро, но в целом по внешнему виду являются типичными поверхностными клетками.
Поверхностная клетка с пикнотическим ядром Фактически ядро в клетке уже мало заметно.
Поверхностная безъядерная клетка (клетка - чешуйка) Крупные, мертвые, неправильной формы клетки, не содержащие ядер. Они представляют собой конечную фазу отмирания, которая начинается уже в парабазальных клетках. Так же часто эти клетки называют "полностью ороговевшими" или "полностью кератинизированными клетками".
Метэстальная клетка Обычно крупнее промежуточных клеток. В их цитоплазме часто находят один или большее количество нейтрофилов. Метэстральные клетки, как правило, обнаруживаются в начале диэструса или в случаях вагинита. Очень редко такие клетки встречаются в начале проэструса.

Во время проэструса парабазальные, промежуточные и некоторые поверхностные клетки отторгаются. Обнаруживаются эритроциты, лейкоциты и бактерии. При приближении эструса отмечается значительное повышение эпителиальных клеток и снижение содержания лейкоцитов.

Во время эструса преобладают поверхностные клетки (иногда они составляют более 90% отторгающихся эпителиальных клеток). Могут обнаруживаться эритроциты и внеклеточные бактерии. Лейкоциты в период эструса отсутствуют, за исключением случаев, когда имеет место сопутствующий воспалительный процесс.

Диэструс сопровождается наличием резких изменений: парабазальные и промежуточные клетки превышают по количеству поверхностные клетки. Слои поверхностных клеток могут отмечаться в начале диэструса. Практически всегда снова появляются лейкоциты. Часто обнаруживаются эритроциты и бактерии.

Такие же изменения происходят во время эстрального цикла у кошек, но у них редко обнаруживают эритроциты и лейкоциты.

Цитологические изменения влагалища сук на разных стадиях эстрального цикла.
Клетки Стадия цикла
Проэструс Эструс Диэструс
Парабазальные клетки + - +
Промежуточные клетки + редко +
Поверхностно промежуточные клетки +/-
появляются ближе к концу
+ +/-
Поверхностные клетки редко, чаще появляются в конце более 80-90 % редко
Эритроциты + +/- +/-
Лейкоциты + - ++/+
Примеры того, что можно увидеть под микроскопом при вагинальной цитолологии у собак, в разные фазы цикла.
Проэструс. Видно большое количество эритроцитов (маленькие красные точки) (х10) Проэструс. Большое кол-во нейтрофилов, эритроцитов, появляются поверхностные клетки. (х40)
Эструс. Более 80% поверхностных клеток (х10) Эструс (х40)
Диэструс. Стрелкой указана метэстральная клетка (х100)
Подготовка собак к вязке.
  • 1. Для вязки подбирайте только здоровых животных.
  • 2. Определите первый день эструса. Начинайте в ранний период течки (на третий день проэструса). Наблюдайте каждый день за поведением суки (провоцируйте ее самцом) и /или проводите регулярное вагинальное цитологическое исследование. Для более точного определения времени овуляции и дат вязки можно определять содержание прогестерона в сыворотке, приблизительно за 24-48 часов до предовуляционного выброса лютеинизирующего гормона (ЛГ) концентрация прогестерона поднимается выше 1,0 нг/мл в типичных случаях спустя 2 дня (во время овуляции) концентрация прогестерона составляет 4-10 нг/мл).
  • 3. Когда поверхностные клетки в мазках достигнут 80% от всего количества эпителиальных клеток, необходимо поместить суку с кобелем.
  • 4. Вязку следует повторять до тех пор, пока сука не начнет отказываться от вязки (не всегда можно определить) и цитологическая картина будет соответствовать эструсу. Интервалы между вязками в среднем 3-4 дня, однако для каждого конкретного случая нужно подбирать свой режим вязок.
  • 5. Обследование на беременность проводится через 21-30 дней. При отсутствии беременности определить содержание прогестерона в сыворотке для оценки овуляции и лютеиновой функции.
Список литературы:

- Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных. М. Уиллард, Г. Тведтен, Г. Торнвальд
- Эндокринология и репродукция собак и кошек. Э. Фелдмен, Р. Нелсон.